Tugas 2

Ninhidrin

Ninhidrin adalah suatu reagen berguna untuk mendeteksi asam amino dan menetapkan konsentrasinya dalam larutan. Senyawa ini merupakan hidrat dari triketon siklik, dan bila bereaksi dengan asam amino menghasilkan zat berwarna ungu.

Uji Ninhidrin atau tes ninhidrin digunakan untuk menunjukkan adanya asam amino dalam zat yang di uji .Dalam uji ini digunakan larutan ninhidrin untuk mendeteksi semua jenis asam amino. Ninhidrin (2,2-Dihydroxyindane-1,3-dione) merupakan senyawa kimia yang digunakan untuk mendeteksi gugus amina dalam molekul asam amino. 

                Asam amino bereaksi dengan ninhidrin membentuk aldehida dengan satu atom C lebih rendah dan melepaskan molekul NH3 dan CO2. Ninhidrin yang telah bereaksi akan membentuk hidrindantin. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya kompleks berwarna biru/keunguan yang disebabkan oleh molekul ninhidrin dan hidrindantin yang yang bereaksi dengan NH3setelah asam amino tersebut dioksidasi. Untuk lebih jelas dapat dilihat pada Gambar 2.

 Adapun prinsip reaksinya akan dijelaskan seperti berikut ini.

Ninhydrin merupakan oksidator yang menyebabkan dekarboksilasi oksidatif dari α asam amino yang menghasilkan CO2, NH3, dan aldehid yang rantainya lebih pendek 1 C dari asam amino asalnya. Ninhydrin yang tereduksi akan bereaksi dengan NH3 sehingga membentuk senyawa kompleks berwarna biru atau ungu dengan absorpsi warna maksimum pada panjang gelombang 570 nm. Reaksi ini bereaksi positif hampir dengan semua jenis protein.

Ringkasan Reaksi

  

Ninhidrin + asam amino              hidrindantin (perubahan dari ninhidrin) + aldehida + NH3 + CO2   (pecahan asam amino)

·         Ninhidrin + hidrindantin + NH3             senyawa berwarna biru/keunguan.

Uji Ninhidrin.

A. Alat dan Bahan

Alat : Bahan :

1. Tabung reaksi 1. Larutan Ninhidrin 0,1 %

2. Pipet tetes 2. Ekstrak kedelai

3. Penjepit tabung reaksi 3. Ekstrak telur

4. Rak tabung reaksi 4. Ekstrak keju

5. Gelas ukur

6. Lampu spiritus

B. Langkah Kerja

1. Siapkan alat yang sudah dibersihkan dan bahan yang diperlukan.

2. Isilah tabung reaksi (Tabung A, B dan C) dengan 1 ml ekstrak kedelai

untuk tabung A, ekstrak telur untuk tabung B dan ekstrak keju untuk

tabung C.

3. Tambahkan 5 tetes larutan ninhidrin 0,1 % pada masing-masing tabung.

4. Panaskan langsung ke lampu spiritus hingga mendidih, posisi tabung

reaksi miring (hati-hati jangan diarahkan kebadan atau teman satu

kelompok).

5. Diamkan larutan sampai dingin, amati warna yang terjadi !

Kesimpulan

Uji ninhidrin adalah berdasarkan adanya reaksi antara asam amino dengan pereaksi ninhidrin disertai pemanasan sehingga menghasilkansenyawa kompleks berwarna ungu.

Dengan pemanasan, ninhidrin ditambah hidridantin menghasilkan warna biru dan ada juga yang lepas yaitu asam karboksilat dan CO2. Jadi pada saat pemanasan,zat pengoksidasi ninhidrin dengan asam amino,terjadi reaksi dalam 2 tahap yaitu, reaksi pembentukan hidridantin ( ninhidrin tereduksi ) dan reaksi pembentukan produk yang berwarna.  Produk yang berwarna ini terbentuk dari hidridantin dan amoniak yang tersisa.

Note